产品货号:
M20249
中文名称:
SgeI内切酶
英文名称:
Sge I Endonuclease
产品规格:
250U
发货周期:
1~3天
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SgeI限制性内切酶可识别与切割单链或双链DNA上含有5-甲基胞嘧啶的DNA靶标。其在37℃具有最佳切割效果。Sge I的储存缓冲液中预混了BSA,可增强酶的稳定性,并能与DNA制剂中可能存在的污染物结合。
在1×Sge I Buffer条件下,1μg pUC19-Sge I DNA (Dcm+)在50μL反应体系中37℃孵育1h,不断增加酶量,直至酶切产物DNA带型不随着酶量的增加而发生变化,此时酶量定义为1U。
组分 | 规格 |
Sge I(5U/μL) | 50μL |
10×Sge I Buffer | 1mL |
保存:-20℃,有效期2年。
DNA甲基化修饰对Sge I酶切影响:
Dam | Dcm | CpG | EcoKI | EcoBI |
无影响 | 总是切割被Dcm甲基 转移酶甲基化的DNA | 切割与CpG甲基化 序列重叠的靶点 | 无影响 | 无影响 |
- 底物至少需要2个Sge I识别序列才能有效酶切。
- 甲基化DNA完全酶切取决于Sge I的识别位点的数量。另外由于识别位点酶切产生的DNA产物会促进Sge I的非特异性酶切,因此建议酶切时优化Sge I的用量。
- 本制品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品。
- 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
- 在冰上按下表配制反应体系:
成分 用量 ddH2O 至20μL 10×Sge I Buffer 2μL 底物DNA 2μL (0.5~2μg) Sge I 0.2~1μL 总体积 20μL - 反应体系可按比例放大或缩小。反应时间不建议超过1h。
- 轻轻吸打或轻弹管壁混匀反应液。切勿涡旋。瞬时离心收集挂壁液滴。
- 37℃孵育1h。
- 可选步骤:80℃孵育20min可使酶失活,停止反应。
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